Monitorización Farmacológica Integral de la Inmunosupresión

Cromatografía líquida acoplada a la Espectrometría de masas en tandem

La cromatografía líquida acoplada a la espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) es una potente técnica analítica que combina el poder de separación de la cromatografía con la gran selectividad, sensibilidad y precisión en la determinación de la masa molecular de la espectrometría de masas, proporcionando información cualitativa y cuantitativa sobre una sustancia. 

Los componentes (fármacos y/o metabolitos) de la muestra separados por cromatografía pasan al espectrómetro de masas a través de una interfase y un bloque de ionización, obteniéndose los aerosoles con los fármacos en estado gaseoso cargados eléctricamente. Los iones generados son acelerados hacia los cuadrupolos y separados en función de su relación masa/carga (m/z) mediante la aplicación de campos eléctricos, magnéticos o simplemente determinando el tiempo de su llegada a un detector. Los iones que llegan al detector producen una señal eléctrica que es procesada, ampliada y enviada a un ordenador. El registro obtenido se denomina espectro de masas y representa las abundancias iónicas obtenidas en función de la relación masa/carga de los iones detectados.

La espectrometría de masas presenta grandes ventajas en su aplicabilidad en el laboratorio clínico, permitiendo analizar de forma muy sensible y específica utilizando muy poca cantidad de muestra un amplio espectro de sustancias, que a su vez se pueden identificar y cuantificar.

Es una técnica de gran utilidad y que ha supuesto una revolución en el laboratorio clínico, así como en el diagnóstico de enfermedades y en la monitorización de tratamientos.

Cuantificación de inmunosupresores en sangre impregnada en papel (DBS) 

Hemos desarrollado el método de análisis de tacrolimus y los inhibidores de mTOR en sangre capilar empleando muestras de sangre (50 µL) impregnadas en discos de papel secante (del inglés,  dry blood spot (DBS)).

El objetivo del desarrollo de este método es permitir al paciente la obtención de la muestra, en condiciones muy estandarizadas, desde casa y poderla remitir por correo ordinario, sin necesidad de acudir al centro hospitalario. Teniendo en cuenta que se trata de una monitorización de las concentraciones de fármaco (diversos análisis requeridos a lo largo del año) esta estrategia supone una notable mejora en la calidad de vida del paciente.  

Genotipado de CYP3A5 (*1/*3) y CYP3A4 (*22)

Los estudios farmacogenéticos (genotipo) nos permiten predecir el fenotipo metabolizador de los pacientes y escoger desde el inicio la mejor dosis inicial de tacrolimus para alcanzar concentraciones dentro de las dianas terapéuticas. Los alelos CYP3A5 (*1/*3) y CYP3A4 (*22) presentan una clara asociación en cuanto al requerimiento de dosis de tacrolimus.

Obtención del área bajo la curva (AUC) de inmunosupresor en sangre/plasma 

En nuestro laboratorio ofrecemos la posibilidad de medir el área bajo la curva (AUC) de los inmunosupresores: ciclosporina, tacrolimus, everolimus y rapamicina en sangre y ácido micofenólico en plasma, ya que es el parámetro farmacocinético que aporta más información sobre la exposición del fármaco y, por lo tanto, del potencial efecto terapéutico o tóxico.